全剧采用了1997年、1998年和2016年三条时间线,从1997年风华正茂的年代讲起,彼时王响(范伟饰)是意气风发的桦钢火车司机,龚彪(秦昊饰)是刚刚分到桦钢厂办的大学生,马德胜(陈明昊饰)还是英姿飒爽的刑警队长。当时间线转至18年后,王响失去妻儿、困于悬案,马德胜在老年舞里寻找存在感,而龚彪早已大腹便便,成了一个油腻的中年人。18年前的凶案如何改变了一群人的人生,随着倒叙的时间线展开,得以娓娓道来。蘑菇王国的透明管道、浮在空中的问号砖块、阴森森的洋楼、组装卡丁车的选装界面、赛道上擦出的紫色火花……这一个个游戏元素,唤起了许多玩家在游戏中度过的快乐时光,想起了和朋友一起“互坑”时的欢声笑语。影片中不少游戏要素的设置简单粗暴,但有效,因为它来自于马力欧这个陪伴许多观众长大的IP。与许多游戏改编电影相比,《超级马力欧兄弟大电影》确实非常彰显玩家属性——它是由玩家拍出来的电影,也更合适玩家观看。